具體操作方法如下:
1、 測定前的準備:包括開(kāi)機預熱、按差值標定方式標定IRGA、將測定用的儀器設備連接成一個(gè)開(kāi)放系統。取葉片,測定葉面積后將其放入葉室,調節控制葉室至葉片的光合作用適溫度。
2、 葉片照光及測定操作:
1. 改變光源和葉片之間的距離,使到達葉片表面的光強為200μmol·m·s左右。待IRGA表頭上的指針?lè )€定在一個(gè)位置后讀取經(jīng)過(guò)葉片前后空氣CO2濃度變化的差值,按開(kāi)放式系統Pn的計算公式計算光合速率。
2. 在光源和葉片之間放置一至數層白紗布,使到達葉片表面的強度每次減少50μmol·m·s,并在每一光強度下停留2~3min后讀取空氣CO2濃度變化的差值,計算光合速率,直到光強為零,光合速率為負值時(shí)止。
3、 繪制葉片光合作用對光的響應曲線(xiàn):將測定的每組數據以光強為橫軸,光合速率為縱軸,將每一光強下光合速率值畫(huà)到坐標紙上的相應位置。再將大于0的光合速率值各坐標點(diǎn)用直線(xiàn)連接起來(lái),該直線(xiàn)的斜率便是葉片的表觀(guān)光合量子效率值。該直線(xiàn)與橫軸的交點(diǎn)為光補償點(diǎn),與縱軸的交點(diǎn)則為暗呼吸速率(圖2-10)。
由于實(shí)驗過(guò)程中一些難免誤差,所測各點(diǎn)未必都在一條直線(xiàn)上,因此畫(huà)線(xiàn)時(shí)會(huì )帶有一些人為因素,造成表觀(guān)光合量子效率值或高或低的誤差。為了避免這一誤差,好是用計算器或計算機對這些光強-光合速率資料作直線(xiàn)回歸,得到如下一直線(xiàn)回歸方程:
Pn=-R+Φ(PFD)
這里,Pn為光合速率,R為暗呼吸速率,Φ為表觀(guān)光合量子效率,PFD為到達葉片的光量子通量密度,簡(jiǎn)稱(chēng)光強。
操作時(shí)的注意事項
1. 為減小實(shí)驗誤差,用于直線(xiàn)回歸的資料點(diǎn)應多一些,以7~8個(gè)為宜。在作直線(xiàn)回歸時(shí),不要使用那些光合速率為負值的資料點(diǎn)。由于Kok效應的影響,那些點(diǎn)往往明顯偏離直線(xiàn),使得到的Φ值偏高或偏低。
2. 本節介紹的是針對用和離體葉片進(jìn)行的測定而言的。目前先進(jìn)的CIRAS-3光合作用測定系統具有控制溫度、光強度等功能,可以方便地進(jìn)行該指標的測定。
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